Identifiant pérenne de la notice : 247604828
Notice de type
Notice de regroupement
Note publique d'information : Les rotavirus constituent un groupe de virus classe dans la famille des Reoviridae
et sont reconnus comme l'agent étiologique majeur des gastro-entérites néonatales
de nombreuses espèces animales. Notre connaissance du cycle viral est encore très
incomplète et en particulier du rôle joué par les cinq protéines non structurales
dans la réplication virale. La protéine non structurale NS53 codée par le segment
5 est synthétisée à faible niveau dans la cellule. Pour étudier ses propriétés fonctionnelles,
l'ADNc du gène 5 de rotavirus bovin a été cloné dans un vecteur de transfert baculovirus
sous le contrôle du promoteur fort de la polyédrine. Les baculovirus recombinants
expriment, dans les cellules d'insecte, la protéine NS53 en quantité importante sous
une forme stable mais insoluble. L'expression abondante de la protéine recombinante
nous a permis d'obtenir un antisérum spécifique de la protéine NS53 naturelle présente
dans les cellules MA104 infectées par le rotavirus. A l'aide de ce sérum, nous avons
confirmé que la protéine NS53 n'est pas associée aux particules virales simple ou
double capside, mettant ainsi fin aux controverses sur sa nature non structurale.
L'analyse de la séquence de la protéine révèle la présence de deux arrangements de
cystéines caractéristiques d'un motif « doigt à zinc » récemment identifié dans la
séquence de nombreuses protéines régulatrices qui fixent les acides nucléiques. De
plus, bien que le segment 5 montre une extrême variabilité de séquence, le motif «
doigt à zinc » de l'extrémité NH2 terminale de la protéine NS53 reste hautement conservé
au sein des souches de rotavirus des groupes A et C. Par l'utilisation de plusieurs
méthodes, nous avons montré que la protéine recombinante fixe spécifiquement le zinc
et que celui-ci est impliqué dans la conformation compacte de la protéine en solution.
En outre, la purification de la protéine recombinante par FPLC nous a permis de mettre
en évidence la fixation de l'ARN simple brin sur la protéine. L'ensemble de ces résultats
nous conduit à formuler l'hypothèse que la protéine NS53 pourrait être impliquée dans
la formation des particules précoces RI et le regroupement ou l'encapsidation de l'ARN
(+) dans les particules virales immatures.
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Documentation
